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NEB/CLIP-Surface™ 488/S9232S/50 nmol
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NEB/CLIP-Surface™ 488/S9232S/50 nmol

价格: ¥3684.00 市场价: 6140.00

货号: S9232S-50nmol
品牌: NEB
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      CLIP-Surface™488isaphotostablegreenfluorescentsubstratethatcanbeusedtolabelCLIP-tag™fusionproteinsonthesurfaceoflivingcellsorinvitro.Thiscellimpermeablesubstrate(BC-488)isbasedonATTO-TECdyeATTO488andissuitableforstandardfluoresceinfiltersets.Ithasanexcitationmaximumat506nmandemissionmaximumat526nm.Thispackageincludes50nmolofCLIP-Surface488substrate,sufficienttomake10mlofa5µMCLIP-tag™fusionproteinlabelingsolution.

      TheCLIP-tag™proteinlabelingsystemenablesthespecific,covalentattachmentofvirtuallyanymoleculetoaproteinofinterest.CLIP-tagisaproteintagbasedonhumanO6-alkylguanine-DNA-alkyltransferase(hAGT).CLIP-tagsubstratesarederivativesofbenzylcytosine(BC).Inthelabelingreaction,thesubstitutedbenzylgroupofthesubstrateiscovalentlyattachedtothereactivecysteineofCLIP-tagformingastablethioetherbond.AlthoughCLIP-tagisbasedonthesameproteinasSNAP-tag,thebenzylcytosinesubstratesformaseparateclassofsubstrates,differentfromthebenzylcytosinesubstratesformaseparateclassofsubstrates,differentfromthebenzylguaninesubstratesrecognizedbySNAP-tag.CLIP-tagandSNAP-tag®canbeusedfororthogonalandcomplementarylabelingoftwoproteinssimultaneouslyinthesamecells.

      Therearetwostepstousingthissystem:subcloningandexpressionoftheproteinofinterestasaCLIP-tagfusion,andlabelingofthefusionwiththeCLIP-tagsubstrateofchoice.ExpressionofCLIP-tagfusionproteinsisdescribedinthedocumentationsuppliedwithCLIP-tagplasmids.ThelabelingofthefusionproteinsonthecellsurfacewiththeCLIP-tagsubstrateisdescribedinthisdocument.

      Figure1: LiveCHO-K1cellstransientlytransfectedwithpCLIPf-NK1R(tm)
      Figure 1: Live CHO-K1 cells transiently transfected with pCLIPf-NK1R(tm)
      CellswerelabeledwithCLIP-Surface488(tm)(green)for60minutesandcounterstainedwithHoechst33342(blue).
      Figure2: StructureofCLIP-Surface488(MW801.8g/mol)
      Figure 2: Structure of CLIP-Surface 488 (MW 801.8 g/mol)

      Figure3:Excitation(dottedline)andemission(fullline)spectraofCLIP-Surface488coupledtoCLIP-taginbufferatpH7.5
      Figure 3:Excitation (dotted line) and emission (full line) spectra of CLIP-Surface 488 coupled to CLIP-tag in buffer at pH 7.5

      Notes:

      Storage:CLIP-Surface488shouldbestoredat-20°C(longterm)orat4°Cinthedark(shortterm,lessthan4 weeks).Protectthesubstratefromlightandmoisture.Withproperstorageat-20°Cthesubstrateshouldbestableforatleastthreeyearsdryor3monthsdissolvedinDMSO.
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