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NEB/CLIP-Cell™ 505/S9217S/50 nmol
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NEB/CLIP-Cell™ 505/S9217S/50 nmol

价格: ¥3684.00 市场价: 6140.00
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货号: S9217S-50nmol
品牌: NEB
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      CLIP-Cell™505isagreenfluorescentsubstratethatcanbeusedtolabelCLIP-tag™fusionproteinsinsidelivingcells,oncellsurfacesorinvitro.Thiscell-permeablesubstrate(BC-505)isbasedontheDyomicsdyeDY-505andissuitableforstandardfluoresceinfiltersets.Ithasanexcitationmaximumat504nmandemissionmaximumat532nm.Thispackageincludes50nmolofCLIP-Cell505substrate,sufficienttomake10mlofa5µMCLIP-tagfusionproteinlabelingsolution.

      TheCLIP-tagproteinlabelingsystemenablesthespecific,covalentattachmentofvirtuallyanymoleculetoaproteinofinterest.CLIP-tagisaproteintagbasedonhumanO6-alkylguanine-DNAalkyltransferase(hAGT).CLIP-tagsubstratesarederivativesofbenzylcytosine(BC).Inthelabelingreaction,thesubstitutedbenzylgroupofthesubstrateiscovalentlyattachedtothereactivecysteineofCLIP-tagformingastablethioetherbond. AlthoughCLIP-tagisbasedonthesameproteinasSNAP-tag®,thebenzylcytosinesubstratesformaseparateclassofsubstrates,differentfromthebenzylguaninesubstratesrecognizedbySNAP-tag.CLIP-tagandSNAP-tagcanbeusedfororthogonalandcomplementarylabelingoftwoproteinssimultaneouslyinthesamecells. 

      Therearetwostepstousingthissystem:subcloningandexpressionoftheproteinofinterestasaCLIP-tagfusionwiththeCLIP-tagfusionproteinsisdescribedinthedocumentationsuppliedwithCLIP-tagplasmids.Thelabelingofthefusionproteinsisdescribedinthisdocument. 

      Figure1: LiveCHO-K1cellstransientlytransfectedwithpCLIP-NK1RFigure 1: Live CHO-K1 cells transiently transfected with pCLIP-NK1R

      CellswerelabeledwithCLIP-Cell505(green)for60minutesandcounterstainedwithHoechst33342(blue).
      Figure2: Excitation(dottedline)andemissionspectraoflabel505coupledtoCLIP-taginbufferatpH7.5Excitation (dotted line) and emission spectra of label 505 coupled to CLIP-tag in buffer at pH 7.5
      S9217b_thumb
      Figure3: StructureofCLIP-Cell505(MW586.6g/mol)

      Notes:

      Storage:CLIP-Cell505shouldbestoredat-20°C(longterm)orat4°Cinthedark(shortterm,lessthan4weeks).Protectthesubstratefromlightandmoisture.Withproperstorageat-20°Cthesubstrateshouldbestableforatleastthreeyearsdryor3monthsdissolvedinDMSO.
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