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NEB/SNAP-Vista® Green/S9147S/50 nmol

价格: ¥3684.00 市场价: 6140.00

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货号: S9147S-50nmol

品牌: NEB

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- Description:
  SNAP-Vista® GreenisagreenfluorescentsubstratethatcanbeusedtolabelSNAP-tag^®fusionproteins(incelllysatesorpurifiedproteins)fordetectionbySDS-PAGE.Thissubstrate(BG-VistaGreen)isbasedonfluoresceinandisoptimizedforexcitationwiththe488nmlaserexcitationlineinalaserbasedgelscanner.Itcanalsobeexcitedusing360nmlightfromastandardUV-transIlluminator.Ithasanexcitationmaximumat500nmandemissionmaximaat524nm.Thispackageincludes50nmolofSNAP-VistaGreensubstrate,sufficienttolabelonehundred20µlsamplescontainingSNAP-tagfusionproteinforin-geldetection.
  
  TheSNAP-tagproteinlabelingsystemenables thespecific,covalentattachmentofvirtuallyany moleculetoaproteinofinterest.TheSNAP-tag isbasedonhumanO⁶-alkylguanine-DNA-alkyltransferase (hAGT).SNAP-tagsubstratesare
  fluorophores,biotinorbeadsconjugatedtoguanine orchloropyrimidineleavinggroupsviaabenzyl linker.Inthelabelingreaction,thesubstitutedbenzyl groupofthesubstrateiscovalentlyattachedtothe SNAP-tag.
  
  Therearetwostepstousingthissystem:subcloningandexpressionoftheproteinofinterestasaSNAP-tagfusion,andlabelingofthefusionwiththeSNAP-tagsubstrateofchoice.ExpressionofSNAP-tagfusionproteinsisdescribedinthedocumentationsuppliedwithSNAP-tagplasmids.ThelabelingofthefusionproteinswiththeSNAP-tagsubstratefordetectionbySDS-PAGEisdescribedinthisdocument.
  
  Figure1: Excitation(dottedline)andemissionspectraofSNAP-VistaGreencoupledtoSNAP-taginbufferatpH7.5.
  Figure2: TypicalSDS-PAGEgelfromagelscanner(MolecularDynamicsStormImager,488nmexcitation)
  Lane1fluorescentMWMarker
  Lane2-4SNAP-His(22kD)0.1,0.5,1.0µg
  Lane5-7SNAP-CyA(40kD)0.1,0.5,1.0µg
  Lane8-10MBP-SNAP(63kD)0.1,0.5,1.0µg
  Figure3:StructureofSNAP-VistaGreen(MW628.6g/mol)
  Notes:
  Storage:Storesubstrateat-20°C.AfterdissolvingSNAP-VistaGreenstoreitinaliquotsat-20°Cinthedarkforuptothreemonths.Onceanaliquotisthaweditcanbestoredat4°Cinthedarkforuptotwoweeks.Makesuresubstrate,whichmayprecipitateduringfreezing,iscompletelyredissolvedbeforeuse.Withproperstorageat-20°C,thissubstrateshouldbestableforatleastthreeyearsdry,orthreemonthsdissolvedinDMSO.
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