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NEB/ProtoScript® II Reverse Transcriptase/M0368S/4,000 units
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NEB/ProtoScript® II Reverse Transcriptase/M0368S/4,000 units

价格: ¥1020.00 市场价: 1700.00
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货号: M0368S-4,000units
品牌: NEB
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    • Description:

      ProtoScript®IIReverseTranscriptaseisarecombinantM-MuLVreversetranscriptasewithreducedRNaseHactivityandincreasedThermostABIlity.ItcanbeusedtosynthesizefirststrandCDNAathighertemperaturesthanthewildtypeM-MuLV.Theenzymeisactiveupto48°C,providinghigherspecificity,higheryieldofcDNAandmorefull-lengthcDNAproductupto12kb.

      ProtoscriptIIReverseTranscriptaseperformsaswellasotherRNaseH– ReverseTranscriptasesProtoscript II Reverse Transcriptase performs as well as other RNase H– Reverse Transcriptases

      JurkattotalRNA(1μg)wasusedina20μlfirststrandcDNAsynthesis.Mixturesofallreactioncomponents,exceptforreversetranscriptase,wereheldatdifferenttemperaturesfor3min.200unitsSuperScript®II(A)orNEB’sProtoScriptIIReverseTranscriptase (B)wasaddedandincubatedattheindicatedtemperaturefor50minutes,followedbyheatinactivationfor5minat80°C.1μlofcDNAwasusedina25μlPCRusingLongAmp Taq MasterMix(NEB#M0533)for35–40cycles. LadderListhe2LogDNALadder(NEB#N0469). 
      RobustcDNAsynthesisisachievedevenwithlongertemplatesRobust cDNA synthesis is achieved even with longer templates

      JurkattotalRNA(1μg)wasusedina20μlfirststrandcDNAsynthesiswith200unitsofNEBProtoScriptIIReverseTranscriptase.Reactionswereincubatedat42°Cfor50minutes,followedbyheatinactivationfor5minutesat80°C.1μlofcDNAwasusedina25μlPCRusingLongAmp Taq MasterMix(NEB#M0533)for35–40cycles.Sizesareindicatedabovegel. 
      GeneratehighqualitycDNAevenwithverylowamountsofstartingRNAGenerate high quality cDNA even with very low amounts of starting RNA

      DecreasingamountsofJurkattotalRNA(1μg–1pg)wereusedin20μlfirststrandcDNAsynthesiswith200unitsofNEBProtoScriptIIReverseTranscriptase.Reactionswereincubatedat42°Cfor50minutes,followedbyheatinactivationfor5minutesat80°C.1μlofcDNAwasusedina25μlPCRusingLongAmp Taq MasterMix(NEB#M0533)for40cycles.Thetargetisa0.6kbfragmentofGAPDH.LadderListhe2-LogDNALadder(NEB#N0469). 
      ProtoScriptIIReverseTranscriptase displayssuperiorsensitivityProtoScript II Reverse Transcriptase displays superior sensitivity

      DecreasingamountsofluciferasemRNA(109 to102)moleculeswereconvertedintocDNAinthepresenceof1ngJurkattotalRNAusing50unitsofNEBProtoScriptIIReverseTranscriptase inatotalreactionvolumeof20μl.1/20ofthecDNAproductwasamplifiedusingSsoAdvanced™SYBR®GreenSupermix.Asfewas5moleculesofluciferasemRNAaredetectable.

      ProductSource

      ThegeneencodingamutantM-MuLVReverseTranscriptase(RNaseH–)isexpressedinE. coliandpurifiedtonearhomogeneity.

      ReagentsSupplied

      Thefollowingreagentsaresuppliedwiththisproduct:

      Storeat(°C)Concentration
      ProtoScript®IIReverseTranscriptaseReactionBuffer-205X
      DTT(100mM)-2010X

      Notes:

      ReactionConditions:1XProtoScriptIIReverseTranscriptaseReactionBuffer,10mM DTT,200unitsProtoScriptIIReverseTranscriptase,supplementedwith0.5mMdNTPs(notincluded)and5µMdT23VN(notincluded).Incubateat42°Cfor50minutes.If randomprimersareused,a10minuteincubationatroomtemperatureisrecommendedbeforetransferringto42°C.
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