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NEB/Multiplex PCR 5X Master Mix/M0284S/100 reactions (50 μl vol)

价格: ¥2736.00 市场价: 4560.00

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货号: M0284S-100reactions(50μlvol)

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- Description:
  MultiplexPCRcansimultaneouslydetecttwoormoreproductsinasinglereaction.ThereisanincreasingdemandformultiplexPCRtechniquesinassaysconductedinresearchlaboratoriesandforensic/diagnosticgenotypingassays(1,2).MultiplexPCRcanalsobeusedforsemi-quantitativegeneexpressionanalysisusingCDNAtemplates.TheNEBMultiplexPCR5XMasterMixisaneasy-to-usesolutionfeaturinghighqualityrecombinantTaqDNAPolymerase.Themixisoptimizedforhighyieldandrobustperformance.Itsperformanceisillustratedina15-plexPCRusinghumangenomicDNA(Figure1)andan8-plexPCRusingcDNAproductsastemplates(Figure2).The5Xformulationallowstheusermaximalinputofprimers,templateDNAsandadditionalcomponents.
  Figure1
  15-plexPCRusingvaryingamountsofhumangenomicDNA.1XMultiplexPCR5XMasterMixwasusedwith0.15μMofeachprimer.Thecyclingconditionswere95°Cfor1minute,35cyclesof95°Cfor20seconds,60°Cfor1minuteand68°Cfor2minutes.MarkerMisthe2-LogDNALadder(NEB#N3200).
  Figure2
  8-plexPCRusingcDNAproductsfrom1nghumanspleentotalRNA.Cyclingconditionswere95°Cfor1minute,30cyclesof95°Cfor20seconds,60°Cfor30secondsand68°Cfor2minutes.Ampliconlengthsareindicatednexttogel.
  Figure3
  ComparisonofPCRproductyieldsbetweensingle-plexandmultiplexPCRreactions.FigureAshowsamplificationofhumangenomicDNAfragments(sizesarelistedtotheleftofthegel).Lane1isa3-plexreaction,Lanes2-4aresingle-plexreactions,andLanes5–6are2-plexreactions;Lane7isthe1kbDNALadder(NEB#N3232).FigureBshowstheresultsofexpressionanalysisoffivemRNAsusingcDNAtemplates(firststrandsynthesiswascarriedoutusingtheProtoScriptKitwithhumanspleentotalRNA);Lane1isa5-plexPCRfromcDNAreactions,whileLanes2–6aresingle-plexPCRreactions;Lane7isthe100bpDNALadder(NEB#N3231).
  ProductSource
  AnE.colistrainthatcarriestheTaqDNAPolymerasegenefromThermusaquaticusYT-1.
  Notes:
  Usehighqualityprimers(desaltedorHPLCpurified).Accuratelyquantifyandadjustprimerconcentrationsto50μMin0.5XTEBuffer.IndividuallytestthePCRprimerpairs,preferentiallyinatemperature-grADIentPCRmachine.Mixallprimersequallyat1μMin0.5XTEbuffer.Keepat-20°Cforlongtermstorage.MultiplexPCR5XMasterMixisstablefor15freeze-thawcycleswhenstoredat-20°C.MultiplexPCR5XMasterMixisstableat4°Cforthreemonths.So,forfrequentuse,analiquotmaybekeptat4°C.
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