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特别 提示
注：终止液和显色剂具有腐蚀性，一旦接触到液体，请尽快用大量清水冲洗。
产品介绍 Human TSLP ELISA Kit (Human Thymic Stromal Lymphopoietin Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即人胸腺基质淋巴细胞生成素 ELISA 试剂盒，可以定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组 TSLP 浓度。人胸腺基质淋巴细胞生成素由A、B、C、D 4个螺旋束组成，有2种同型异构体。人与小鼠TSLP氨基酸序列同源性为43%。人上皮细胞和肥大细胞都能产生TLSP。人TSLP mRNA高水平表达于心、肝、睾丸、前列腺；肺、骨骼肌、肾、脾、卵巢、小肠和结肠低水平表达。人TSLP具有多种生物学作用，如通过活化DC，间接促进胸腺Treg的分化；诱导的DC营造Th2型微环境；2DC启动Th2型过敏性疾病；2DC维持免疫平衡，避免肠道自身免疫疾病等。由于TSLP 能促进鼠、人类T细胞的发育，特别是近来发现人TSLP在胸腺中促进了FoxP3+CD4+CD25+Treg的分化与发育；而在过敏性疾病的发病上游它又起着关键作用，其生物学功能引起人们的关注。与鼠不同的是，上述功能发挥,需要预先激活 DC，因此它对于胸腺中T细胞的发育是间接起作用的；过敏原刺激上皮细胞后，分泌TSLP而激活的DC，后者分泌过敏疾病特殊的Th2型细胞因子前出现临床症状。然而，关于 TSLP发挥相应作用所通过的信号途径，目前并不清楚，需要进一步探索与研究。本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样品中人TSLP 浓度。在人TSLP单克隆抗体预包被酶标板中加入适度稀释的样品和标准品，其中的TSLP会与其单抗结合，洗去游离成分；加入生物素化的抗人TSLP抗体，抗人TSLP抗体与结合在单抗上的人TSLP结合而形成免疫复合物，洗去游离的成分；加入辣根过氧化物酶标记的亲合素，生物素与亲合素特异性结合，洗去未结合的酶结合物；加入显色剂，若反应孔中有TSLP，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂出现蓝色；加终止液变为黄色。在450 nm下测OD值，人TSLP浓度与OD 450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线计算出样品中人 TSLP浓度。
UE-H6138S/H6138M/H6138L◆没有信号？1.试剂添加顺序错误或试剂配制不正确。重复实验；检查试剂配制方法；复核试验试剂添加流程。2.HRP被叠氮化合物污染。使用新鲜配制的试剂。3.抗体用量不足。检查是否使用了推荐的抗体量；增加抗体用量（浓度）。4.使用了含胎牛血清的缓冲液复溶抗体。检查使用的试剂。5.捕获抗体与板结合较差。使用ELISA板，而非组织培养板；使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。6.缓冲液受污染。新鲜配置缓冲液。◆整块板呈现规则蓝色？1.洗板不充分或跳过洗涤步骤未去除残留的非结合过氧化物酶。严格按照说明书洗涤流程操作。2.底物溶液预混太早不新鲜。底物溶液混合后须立即使用。3.封板胶纸或试剂储液槽重复使用导致HRP残留污染。每步均需使用新的封板胶纸或试剂储液槽。4.缓冲液有金属或HRP污染。新鲜配置缓冲液。◆标准曲线差？1.链亲和素-HRP结合物量不足。检查倍性稀释是否正确。2.捕获抗体与板结合较差。使用酶标板，而非组织培养板；使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。3.检测抗体量不足。检查稀释度是否正确。4.孵育时间不足。延长底物溶液孵育时间。5.实验操作流程有误。严格按照说明书操作流程。6.标准曲线稀释计算错误。重新计算制作新的标准曲线。
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