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注：终止液和显色剂具有腐蚀性，一旦接触到液体，请尽快用大量清水冲洗。
产品介绍Human IL-18 ELISA Kit (Human Interleukin-18 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即人白细胞介素 18 ELISA 试剂盒，可以定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组 IL-18 浓度。IL-18 是新近发现的细胞因子，结构上它类似于 IL-1，对 T 细胞激活起着关键作用。IL-18 和 IL-1β共享最基本的氨基酸序列（信号序列），具有相似的β折叠方式。与 IL-1β 相似，IL-18 被合成成生物学上的惰性前导分子，缺乏信号肽，需要通过细胞内部的半胱氨酸蛋白酶（又称 IL-1β转化酶 ICE，caspase-1）作用形成具有活性 IL-18 成熟分子。因此，ICE活性抑制剂可以限制IL-18生物活性并可能作为Th1 免疫抑制剂。成熟 IL-18 的生物学活性与 IL-1 密切相关。IL-18 诱导 TNF，IL-1，Fas 配体，以及一些趋化因子的基因表达和合成。IL-18 的活性通过 IL-18 受体复合物起作用。IL-18 受体复合物与 IL-1 受体激活激酶 (IRAK)和肿瘤坏死因子相关因子-R-6 (TRAF-6)相互作用，随后激活 NF kappa B。IL-18 参与先天性免疫和获得性免疫。巨噬细胞、成骨细胞与角质形成细胞等许多细胞均可表达 IL-18。据报道，人角质形成细胞主要表达未加工的 IL-18。在临床上，IL-18 在调节肿瘤，传染病、自身免疫，炎症等都起着重要作用。IL-18 在骨髓移植患者、恶性血液病、败血症等血清中有显著升高。研究发现：IL-18 在肝脏切除术后、肝炎疾病及肝功能异常、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、HIV-1 感染、炎性中枢神经系统疾病、Crohn´s 疾病、分娩和难产期间妊娠患者中均发现有显著升高。IL-18 在肿瘤免疫治疗中有着独特作用。本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样品中人 IL-18 浓度。在人 IL-18 单克隆抗体预包被酶标板中加入适度稀释的样品和标准品，其中的 IL-18 会与其单抗结合，洗去游离成分；加入生物素化的抗人 IL-18 抗体，抗人 IL-18 抗体与结合在单抗上的人 IL-18 结合而形成免疫复合物，洗去游离的成分；加入辣根过氧化物酶标记的亲合素，生物素与亲合素特异性结合，洗去未结合的酶结合物；加入显色剂，若反应孔中有 IL-18，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂出现蓝色；加终止液变为黄色。在 450 nm 下测 OD 值，人 IL-18 浓度与 OD 450 值之间呈正比，可通过绘制标准曲线计算出样品中人 IL-18 浓度。
UE-H6128S/H6128M/H6128L◆没有信号？1.试剂添加顺序错误或试剂配制不正确。重复实验；检查试剂配制方法；复核试验试剂添加流程。2.HRP被叠氮化合物污染。使用新鲜配制的试剂。3.抗体用量不足。检查是否使用了推荐的抗体量；增加抗体用量（浓度）。4.使用了含胎牛血清的缓冲液复溶抗体。检查使用的试剂。5.捕获抗体与板结合较差。使用ELISA板，而非组织培养板；使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。6.缓冲液受污染。新鲜配置缓冲液。◆整块板呈现规则蓝色？1.洗板不充分或跳过洗涤步骤未去除残留的非结合过氧化物酶。严格按照说明书洗涤流程操作。2.底物溶液预混太早不新鲜。底物溶液混合后须立即使用。3.封板胶纸或试剂储液槽重复使用导致HRP残留污染。每步均需使用新的封板胶纸或试剂储液槽。4.缓冲液有金属或HRP污染。新鲜配置缓冲液。◆标准曲线差？1.链亲和素-HRP结合物量不足。检查倍性稀释是否正确。2.捕获抗体与板结合较差。使用酶标板，而非组织培养板；使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。3.检测抗体量不足。检查稀释度是否正确。4.孵育时间不足。延长底物溶液孵育时间。5.实验操作流程有误。严格按照说明书操作流程。6.标准曲线稀释计算错误。重新计算制作新的标准曲线。
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