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Millipore/ES007-500ML | BCIP/TNBT Single Reagent, Blue/brown, Alkaline Phosphatase Substrate (insoluble)/ES007-500ML/500
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货号: ES007-500ML
品牌: Millipore
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    • Description
      CatalogueNumberES007-500ML
      BrandFamilyChemicon®
      TradeName
      • Chemicon
      DescriptionBCIP/TNBTSingleReagent,Blue/brown,AlkalinePhosphataseSubstrate(insoluble)
      OverviewAlthoughnitrobluetetrazoliumwithindoxylphosphateisconsideredanexcellentsubstrateforalkalinephosphataseimmunoblottingprocedures,theavailABIlityofhighlypuretetranitrobluetetrazolium(5-bromo-4-chloro-3-indoxylphosphate/tetranitrobluetetrazolium)(TNBT)maynowallowtheimmunologistandmolecularBIOLOGisttoachieveevengreatersensitivity.ChemiconInternationalhasmadeavailablearefrigerator-stable,singlecomponentBCIP/TNBTsolutionforWestern,Northern,andSoutherntechniquesaswellasimmunohistochemicalandinsituhybridizationapplications.ThereactionproductobservedisadarkerpurplethanthatobservedwithNBTandmaybeusefulfordetectionofmultiplealkalinephosphataseprobeswhenusedinconjunctionwithBCIP/NBT.MethodologyandreactiontimesaresimilartotheBCIP/NBTsystem,butmaybeshortenedbecauseofincreasedsensitivity.

      NOTE:DONOTUSEPHOSPHATEBUFFERSFORWASHING.InorganicphosphateisapowerfulinhibitorofAP.
      ProductInformation
      PresentationBCIP/TNBTinaproprietarybufferwithenhancer.
      ColorCodeBlack
      StorageandShippingInformation
      StorageConditionsMaintainrefrigeratedat2-8°Cforupto12months.Warmtoroomtemperaturepriortouse.Discardifsolutionisturbidorpurple.
      Applications
      Application500mlBCIP/TNBTSingleReagent,Blue/brown,AlkalinePhosphataseSubstrate(insoluble)forWesternBlotting&IHC.
      KeyApplications
      • WesternBlotting
      • Immunohistochemistry
      ApplicationNotesPROCEDUREFORBCIP/TNBT(ES007):

      1)AfterthefinalbindingreactionwithanAPlabeledprobe,washtissuesectionsormembranethoroughlyinabuffersuchasTris/HClorTris-bufferedsalinecontaining0.1%Tween20.DONOTUSEPHOSPHATEBUFFERS.InorganicphosphateisapowerfulinhibitorofAP.

      2)AfterthefinalwashcompletelycovertissuesectionsormembranewithBCIP/TNBTSolutionandincubate5-15minutesprotectedfromlight.Longerincubationsmaybenecessarydependinguponenzymeactivity.Ifcolordevelopsalmostimmediately,theformazandepositsmayflakeoffofthetissuesectionsormembrane.Ifthisoccurs,furtherdilutionoftheAPprobeisnecessary.Afinelineofformazandepositcircumscribingthebandordot,withnodepositinthecenter,alsosuggestsfurtherdilutionoftheAPprobestobenecessary.

      3)Stoptheenzymereactionbythoroughlywashingtissuesectionsormembraneswithdeionizedwater.

      4)Ifdesired,counterstaintissuesectionsina0.5%NeutralRedsolutionpreparedinaMolL(-1)acetatebuffer.Hematoxylinsolutionswillnotprovideappropriatecontrast.Membranesshouldbedriedandstoredprotectedfromlight.Littleornobackgroundstainingshouldbeobservedonsectionsormembranes.Presenceofexcessivebackgroundstainingindicatesincompleteremovalofnon-boundAPfromthesectionsormembrane.Increasethenumberofwashesorthewashingtimetoremedythisproblem.

      Results:

      AfinedarkpurpleprecipitatewilllocalizeatsitesofAPactivityontissuesections.DarkpurplebandsordotswillbevisIBLeatthesitesofAPactivityonmembranes.
      BiologicalInformation
      PhysicochemicalInformation
      Dimensions
      MaterialsInformation
      MaterialsInformation
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